我的一个亲戚前几年借给他朋友3万元钱一直没有还最近起诉法院一审过了，没有申请鉴定，我想帮忙给问一下不服一审笔迹鉴定结论上诉二审，二审能不能申请鉴定？

对于鉴定结论不服的，可以申请重新鉴定或者补充鉴定。
对于鉴定的次数，民事法律方面没有限制，但二次鉴定结论一致，再做也就没有意义了。
可以申请二审法院指定鉴定机构重新鉴定。
法律链接：《民事诉讼法》第一百三十九条 当事人在法庭上可以提出新的证据。
当事人经法庭许可，可以向证人、鉴定人、勘验人发问。
当事人要求重新进行调查、鉴定或者勘验的，是否准许，由人民法院决定。
第七十六条 当事人可以就查明事实的专门性问题向人民法院申请鉴定。当事人申请鉴定的，由双方当事人协商确定具备资格的鉴定人;协商不成的，由人民法院指定。
当事人未申请鉴定，人民法院对专门性问题认为需要鉴定的，应当委托具备资格的鉴定人进行鉴定。对于鉴定结论不服的，可以申请重新鉴定或者补充鉴定。
对于鉴定的次数，民事法律方面没有限制，但二次鉴定结论一致，再做也就没有意义了。
可以申请二审法院指定鉴定机构重新鉴定。
法律链接：《民事诉讼法》第一百三十九条 当事人在法庭上可以提出新的证据。
当事人经法庭许可，可以向证人、鉴定人、勘验人发问。
当事人要求重新进行调查、鉴定或者勘验的，是否准许，由人民法院决定。
第七十六条 当事人可以就查明事实的专门性问题向人民法院申请鉴定。当事人申请鉴定的，由双方当事人协商确定具备资格的鉴定人;协商不成的，由人民法院指定。
当事人未申请鉴定，人民法院对专门性问题认为需要鉴定的，应当委托具备资格的鉴定人进行鉴定。

【法律意见】在民事诉讼中，根据《最高人民法院关于民事诉讼证据的若干规定》第二十五条规定，当事人申请鉴定，应当在举证期限内提出。如果在一审中没有申请笔迹鉴定的，二审法院按此规定应不予准许。【法律依据】《最高人民法院关于民事诉讼证据的若干规定》第二十五条当事人申请鉴定，应当在举证期限内提出。符合本规定第二十七条规定的情形，当事人申请重新鉴定的除外。对需要鉴定的事项负有举证责任的当事人，在人民法院指定的期限内无正当理由不提出鉴定申请或者不预交鉴定费用或者拒不提供相关材料致使对案件争议的事实无法通过鉴定结论予以认定的应当对该事实承担举证不能的法律后果。第二十七条当事人对人民法院委托的鉴定部门作出的鉴定结论有异议申请重新鉴定提出证据证明存在下列情形之一的人民法院应予准许
(一)鉴定机构或者鉴定人员不具备相关的鉴定资格的；
(二)鉴定程序严重违法的；
(三)鉴定结论明显依据不足的；
(四)经过质证认定不能作为证据使用的其他情形。对有缺陷的鉴定结论，可以通过补充鉴定、重新质证或者补充质证等方法解决的，不予重新鉴定。
第四十三条当事人举证期限届满后提供的证据不是新的证据的，人民法院不予采纳。